HPLC法同时测定参麦注射液中9种人参皂苷

目的建立HPLC法同时测定参麦注射液(红参、麦冬)中人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rc、Ro、Rb_2、Rb_3、Rd的含有量。方法该药物的分析采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.05%磷酸),梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温26℃;检测波长203 nm。结果 9种人参皂苷在各自范围内线性关系良好(r0.999 5),平均加样回收率96.7%～102.3%,RSD 2.3%～4.4%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于参麦注射液的质量控制。     

羟基红花黄色素A的Caco-2细胞摄取转运研究

 目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)的胃肠吸收转运机制。方法采用Caco-2细胞模型考察孵育时间、介质pH、药物浓度及抑制剂(环孢菌素A和叠氮钠)对羟基红花黄色素A摄取转运的影响,并分析HSYA灌胃给药后在大鼠尿及粪中的累积排泄。结果HSYA的摄取符合被动扩散过程,pH7.8环境下药物的细胞摄取量[(1.05±0.045)mg·g^-1]低于pH5.4[(1.24±0.09)mg·g^-1](P<0.05),其在Caco-2单细胞层的表观透过系数(Papp)为(2.16±1.21)×10^-8cm·s^-1,加入环孢菌素A和叠氮钠后其Papp显著提高(P<0.05),分别为(47.92±17.8)×10^-8和(12.53±4.55)×10^-8cm·s^-1。HSYA大鼠灌胃给药(5.6mg·kg^-1)后31h,其尿和粪中的累积排泄量分别为给药剂量的0.74%和28.57%。结论HSYA的吸收基本符合被动扩散过程并有P-gp的参与,其黏膜透过性较差,碱性环境相对不利于药物的吸收。HSYA口服后的胃肠吸收较差,大量的药物被排出体外或在胃肠道内被代谢转化。     

美洲大蠊提取物对3株人及小鼠白血病细胞的细胞毒性研究

目的:通过美洲大蠊提取物对体外白血病细胞的细胞毒性测试,探讨美洲大蠊提取物对白血病细胞的抑制作用.方法:美洲大蠊醇提物,通过聚酰胺柱层析分离划段得不同部位,采用MTT法对所得部位进行人及小鼠白血病细胞的细胞毒性测试.结果:有多个部位样品的IC50值小于10μg/mL.结论:通过样品与对照品细胞毒活性结果比较,表明美洲大蠊提取物中存在具有对人及小鼠白血病细胞生长抑制作用的物质,值得对其进行进一步的研究.     

黄花乌头体细胞胚胎发生及其植株再生

目的 对不同植物激素及其配比对黄花乌头体细胞胚胎诱导及植株再生进行研究，为药用植物黄花乌头的资源开发提供理论依据。方法 以黄花乌头的茎、叶、胚轴、胚根和子叶为外植体考察不同植物激素对黄花乌头愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果 外植体接种于MS 2，4-D 1mg／L 6-BA 0．5mg／L的培养基上愈伤组织诱导率最高，愈伤组织在MS 2，4-D 0．2rng／L 6-．BA 0．5mg／L的培养基上连续继代几次后，分化出淡绿色具有圆锥状或原球状突起的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织能够在MS 6-BA2 mg／L的培养基上形成不定芽，该芽能够在MS＋IBA 0．5mg／L的培养基上生根．形成完整的再生植株。结论 利用体细胞胚胎发生技术可以成功地得到再生植株，从而为濒危植物黄花乌头的资源开发和保护提供新途径。     

(His)6 -eIF3s4融合蛋白在人乳腺癌细胞Bcap37中的表达

目的：构建真核细胞翻译起始因子3第4亚单位（eIF3s4）真核表达载体用于进一步功能研究。方法：设计引物,以K562细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增eIF3s4的全长编码区cDNA,克隆于pGEM-TEasy载体,经DNA测序并与GenBank数据库序列进行比对后,将该cDNA序列亚克隆于真核表达载体pcDNA4/HisMaxB载体,构建成（His）6-eIF3s4融合蛋白的表达载体,用LipofectamineTM2000瞬时转染人乳腺癌细胞株Bcap37,利用Westernblot方法检测（His）6-eIF3s4融合蛋白的表达。结果：DNA序列测定表明,利用RT-PCR方法克隆的eIF3s4全长编码区cDNA序列与GenBank数据库序列一致,Westernblot结果证实（His）6-eIF3s4融合蛋白在Bcap37细胞中获得预期表达。结论：成功地构建了eIF3s4的真核表达载体并在人乳腺癌细胞Bcap37中表达,为建立稳定的eIF3s4高表达细胞系,进而研究eIF3s4与肿瘤细胞多药耐药相关性打下了基础。     

苯巴比妥诱导对普罗帕酮体外I相代谢的立体选择性影响

目的：观察苯巴比妥对S（ ）-和R（-）-普罗帕酮（PPF）体外I相代谢有无立体选择性的影响。方法：将消旋普罗帕酮与对照或苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体孵育后,采用手性衍生化反相高效液相色谱法,测定对映体的经时孵育曲线和酶动力学参数（最大反应速度、米氏常数、内在消除率）。结果：在对照大鼠肝微粒体中,PPF的I相代谢无立体选择性。经苯巴比妥诱导处理后,在5mg/L底物浓度时R（-）-PPF的代谢快于S（ ）-PPF,两对映体的米氏常数和内在清除率有显著性差异。结论：苯巴比妥选择性地诱导了大鼠肝微粒体对PFF的I相代谢。     

聚—（羟丙基、丙基）—天冬酰胺材料体外酶解及植入小鼠体内的观察

目的：观察4种不同摩尔比的聚－（羟丙基、丙基）－天冬酰胺材料在体外酶解和植入小鼠体内后的变化。方法;用木瓜蛋白酶和胰酶对材料作了体外酶解试验,用凝胶色谱法对降解物碎片作了测定;用光镜、扫描电镜、透射电镜等对材料在埋植部位、肝、肾组织内的降解碎片进行观察;对材料植入小鼠体内后的生化指标（血红蛋白、白细胞、谷丙转氨酶、肌酐作了测定。结果：聚－（羟丙基、丙基）－天冬酰胺材料在体外能被逐步酶解。在植入小鼠体内的5周内,在埋植部位、肝、肾组织内能观察到材料的碎片。结论：聚－（羟丙基、丙基）－天冬酰胺材料能在体内、外逐步降解,植入小鼠体内后对动物的血象、肝、肾功能无明显的影响,具有生物相容性。     

大肠杆菌T蛋白的高效表达和分离纯化

 目的构建高效表达菌株，以大量表达大肠杆菌T蛋白，为后续的新药作用靶点研究提供活性蛋白质材料。方法利用高效表达质粒pET26b+克隆了大肠杆菌TyrA基因，并在其C端融合了一个由6个组氨酸组成的his-tag以利分离纯化。结果T蛋白的表达量达每1L培养液200 mg，细胞裂解液经一次his-tag亲和柱色谱，纯度达98%，分支酸变位酶和预苯酸脱氢酶的比活性分别为130和98 U·mg^-1。结论本法表达的大肠杆菌T蛋白，表达量高，纯化容易，酶活性正常，为进一步研究T蛋白的结构与功能，并进行新药设计奠定了基础。     

金刚烷类药物的研究进展

对具有饱和三环癸烷结构的金刚烷胺类药物的抗病毒、抗帕金森氏综合征、抗丙型肝炎等临床药理作用及部分药物的合成路线作一综述。     

离子强度对丙基甲基纤维素骨架片释药的影响

目的：探讨溶出介质的离子强度对难溶性药物的丙基甲基纤维素（HPMC）骨架片释药的影响。方法：以甲氧苄胺嘧啶、卡马西平、磺胺甲恶唑和茶碱4种难溶性药物为模型药物，测定5种不同离子强度介质（水、0．20％氯化钠溶液、0．50％氯化钠溶液、0．90％氯化钠溶液和1．80％氯化钠溶液）下的药物释放度和溶出参数。结果：难溶性药物的HPMC骨架片释药随着其溶出介质离子强度的增加而减慢。结论：释药速率与离子强度之间存在较好的线性负相关关系。